酶，它通过将一个锌指dna结合结构域与核酸酶的一个dna切割结构域融合而产生。通过设计锌指结构域就可以实现对目的基因的特定dna序列的靶向切割，这也使得锌指核酸酶能够定位于复杂基因组内的独特的靶向序列。通过利用内源dna修复机制，锌指核酸酶可用于精确修饰高等生物的基因组。zfn也就是锌指核酸酶，虽然克服了巨型核酸酶的局限性，在每140个核苷酸中可有一个识别位点，但因为dna结合元件的相互影响，zfn同巨型核酸酶差别不大，两种方法的精确度都是不可预测的。”

    “其三，转录激活样效应因子核酸酶，简称talen，talen是经过基因工程改造后的可以切割特定dna序列的限制酶。talen是通过将一个tal效应子dna结合结构域与核酸酶的一个dna切割结构域融合而获得的。talens可以被设计成与几乎任何所需的dna序列结合，因此当与核酸酶结合时，dna可以在特定位置进行切割。talen比前两种方法更高效，而且准确率也是所有方法中最高的，但遗憾的是，talen只能针对特定的dna进行切割，所以这导致其成本太高。”

    “最后一种方法，那就是成簇规律间隔短回文重复技术，crispr-cas是原核生物免疫系统，赋予原核生物对如存在于质粒和噬菌体中的外来遗传物质的抗性，是一种获得性免疫系统，携带间隔序列的rna有助于cas蛋白识别并切割外源致病dna。其它rna指导的cas蛋白切割外源rna，crispr核酸酶相比talen的精确度略低，但它确有一个其他三种方法都不具备的优势，那就是可以使用其80nt crispr sgrna直接定位不同的dna序列，以此可大大节约成本的同时，还能大大提高时效性。所以，如果我是基因能量公司高层，肯定会选择成簇规律间隔短回文重复技术。”

    就在秦然讲解的时候，不少生物基因学暗暗点头，他们听得出，秦然不是说大话，他真的自学过生物基因学，并且在生物基因学上的造诣不低，水平至少和生物基因学一级高工持平。因为随便去拉十个普通生物基因学的研究人员，恐怕有九个都不能将基因编辑的四种方法阐述清楚。

    但秦然的讲解还没有结束。

    “相比巨型核酸酶和锌指核酸酶，crispr-cas的精确度已经很高了，但脱靶效应仍然是基因编辑中最大的副作用”

    此时有专家打断秦然：

    “crispr-cas9技术发明人之一詹妮弗·杜德纳三年前已经证实，抗 crispr蛋白能将 crispr导致的脱靶效应降低四分之一，其中“acrl4”的蛋白甚至能将脱靶效应发生率减少 4倍，而整个过程中目标位点的基因编辑没有受到丝毫影响，还有”

    秦然不紧不慢抢过话头：“你是想说去年3月18日，约瑟夫·邦迪-德努米团队在李斯特细菌中发现了 4种能够阻断 crispr-cas9活性的蛋白质，其中包括 acrl4蛋白。4月25日，他们团队又在从一种脑膜炎细菌中发现了另 3种这类蛋白质。”

    “额！”被打断话的专家一愣，秦然说的，好像真是他准备说的。

    等等，感觉哪里不对，是了，你一个机械类的科研人员，关注生物基因技术干嘛，这不是抢饭碗嘛，难道要逼着我们搞生物基因的去学机械？

    秦然继续说下去。

    “抗 crispr蛋白能将 crispr导致的脱靶效应降低四分之一，“acrl4”的蛋白甚至能将脱靶效应发生率减少 4倍，但即使这样，仍然达不到talen957的精确率，脱靶效应仍然存在。即便将来可以把这个精确度提升到99，那也还有1的几率脱靶。就像硅元素，实验室能制出999999999999的硅，单仍有十亿分之一的杂质。”

    “相比十亿分之一的几率，1太大，我们就假设脱靶效应的几率是十亿分之一，在这个数字足够小了吧，但相比动物身体中庞大的dna数目，双方做乘法得出的数字依然巨大。”

    “我们可以拿人体为例子简单推算一下，人体由40-60万亿个细胞组成，我们取中间值50万亿，每个细胞含30亿个碱基对，当然，这是大致推算，就不排除红细胞、生殖细胞、线粒体等特殊存在。也就是说，人体大约有1500万亿亿个碱基对，想要对这么多碱基对进行编辑，即便将脱靶效应的几率降到十亿分之一，仍然会150万亿次产生脱靶效应。这个数字，依旧庞大到无法想象。”

    “脱靶效应会引发什么样的后果呢，去年8月30日，国外一篇名为“unepected utations after crispr-cas9 editg  vivo”的论文提到过，论文称，cris能够引入数百种意想不到的突变到基因组，其中包括了单核苷酸突变和基因组非编码区域的突变。”

    “所以我个人认为，芝加哥出现的巨兽，之所以表现出强烈的攻击性，和脱靶突变有关。”

    当秦然抛出自己的观点，瞬间，整个会议室都轰动了。
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